新冠病肺炎核酸检测结果该怎么看？一篇小文章告诉你

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COVID-19病仍在世界各地肆虐。随着复工复产复课的加速，COVID-19核酸检测已成为常态化检验指标。希望这项测试能够消除并检测出感染了COVID-19的人。今天我们就科普一下什么是核酸检测？

在COVID-19全大流行的背景下，我们可能需要在复工、复产、复课过程中进行COVID-19检测。了解这些测试技术并解释测试结果非常重要。主要方法是SARS-CoV-2病逆转录酶-聚合酶链反应。

1.核酸检测方法

简单流程图

1检测样本的获取新型冠状病主要侵入呼吸道，因此一般可通过咽拭子、鼻拭子、痰液、粪便等采集样本。临床上主要采集咽拭子。除鼻咽拭子外，其他标本的PCR阳性结果出现时间不同。在一项研究中，96名感染者中有55人的粪便中检测到PCR阳性，而在鼻咽拭子阴性后的粪便中，PCR阳性率保持在4-11天，但与临床严重程度相关。没事做。在205例确诊为COVID-19感染的患者中，RT-PCR阳性率最高的是支气管肺泡灌洗标本，其次是痰液、鼻拭子、咽拭子，共5例。

2提取RNA病的遗传物质主要是核酸，包括核糖核酸RNA和脱氧核糖核酸DNA。遗传物质就像人类的指纹。通过识别DNA或RNA，您可以知道它是哪种病。为了检测COVID-19病RNA，必须首先从患者标本中提取所有RNA。细胞和组织样品的提取方法相同。常用的方法是TRIzol提取法。所用试剂为TRIzol、氯仿、异丙醇和乙醇。

3模板PCR扩增现在病RNA已经提取出来了，直接检测还不够吗？为什么我们需要执行这一步？PCR扩增的目的是将少量的RNA通过2的N次方进行扩增，这使得我们更容易检测到目标RNA。但PCR扩增的模板必须是DNA，所以为了检测新冠病RNA，必须先将其反转录成cDNA，然后添加试剂材料，让它以2次方进行复制。这个过程是动态实时进行的，检测器可以向反应体系中添加荧光探针或荧光染料。随着DNA的每次复制，荧光强度也会增强。通过检测荧光强度，我们可以推断出原始RNA。专注。这就是核酸检测的核心技术，实时荧光定量PCR。

4核酸检测结果解读荧光定量PCR中的一个重要概念是Ct值，即荧光值达到阈值时的PCR循环数，与初始模板量成反比，即Ct值越大，病含量越少。Ct值越小，病含量越大。与模板起始拷贝数的对数呈线性关系。我们可以用已知起始拷贝数的标准样品来描述标准曲线y=aX+b，其中y代表Ct值，X为起始拷贝数的对数，a和b为常数。这样，我们只需测量测试样本的Ct值，将其带入曲线即可计算出病量。同一标本检测两次以上，以最终检测结果判断为阳性或阴性。

PCR中Ct值的测定

在大多数有症状的COVID-19感染者中，鼻咽拭子中的病RNA在症状出现的第一天即可检测到，并在症状出现的第一周内达到峰值。在临床检测中，Ct值小于40被认为是PCR阳性。这种阳性结果从第3周开始下降，随后消失。但重症住院患者的Ct值低于轻症患者，且PCR阳性可持续至发病后3周，而大多数轻症患者会产生阴性结果。PCR结果呈阳性仅反映病RNA的存在，并不一定表明存在肺炎活病。在某些情况下，即使在第一次PCR检测呈阳性后6周，RT-PCR仍然可以检测到病RNA。少数病例在24小时内连续两次PCR检测呈阴性后也呈阳性。这些检测结果的不确定性导致美国疾病控制与预防中心采用“基于症状的策略”来确定COVID-19的传染性，仅认为“康复后至少3天内不发烧”无需使用退烧药物。”它的定义是当发烧消退后，医务人员就可以重返工作岗位。

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